Molecular analysis of over-expression of NPR1 gene in putative transgenics of Brassica juncea plants

Abstract: 
Brassica accounts for nearly 27% of vegetable oil requirements of India. Its production however is constrained by Alternaria blight ( Alternaria brassicae). The absence of resistance genes within crossable germplasm of Brassica juncea necessitates the use of genetic engineering strategies to develop genetic resistance against this pathogen. Potential of regulatory genes for developing fungi- and bacteria-resistant transgenic plants has been demonstrated in Arabidopsis and other plants, one such regulatory gene being NPR1. Brassica juncea NPR1 (BjNPR1) gene was over-expressed in Brassica juncea. Transformation of hypocotyls of B. juncea var. Varuna with the BjNPR1 gene under the control of constitutive CaMV35S promoter using Agrobacterium tumefaciens strain EHA105 resulted in about 1.4% of transformation efficiency. The integration of BjNPR1 into the plant genome was confirmed by PCR using NPTII primers, in which 90% of the plants analyzed were found to be PCR positive. Moreover, over-expression of the BjNPR1 transcript was shown in 60% of the total plants analyzed by RT-PCR using NPR1 primers.
Brassica survient à près de 27% des besoins en huile végétale de l’Inde. Toutefois sa production est limitée par la brûlure Alternaria (Alternaria brassicae). L’absence de gènes de résistance au sein du germoplasme de Brassica juncea nécessite l’utilisation du génie génétique pour développer une résistance génétique contre ce pathogène. Le potentiel de gènes régulateurs pour le développement de plantes transgéniques résistantes aux champignons et bactéries a été démontré chez Arabidopsis et d’autres plantes, l’un de ces gènes régulateurs étant le NPR1. Le gène NPR1 (BjNPR1) de Brassica juncea a été surexprimé chez Brassica juncea. La transformation des hypocotyles de B. juncea var. Varuna avec le gène BjNPR1 sous contrôle de CaMV35S en utilisant la souche EHA105 d’Agrobacterium tumefaciens a donné environ 1,4% d’efficacité de transformation. L’incorporation de BjNPR1 dans le génome de la plante a été confirmée par PCR en utilisant des amorces NPTII, dans lesquelles 90% des plantes analysées se sont révélées positives à la PCR. Par ailleurs, la surexpression du gene BjNPR1 a été montrée dans 60% des plantes analysées par RT-PCR en utilisant des amorces NPR1.
Language: 
Abkhazian
Date of publication: 
2016
Volume: 
14
Number: 
3
Pagination: 
179-184
Collection: 
RUFORUM Working document series
Licence conditions: 
Open Access
Access restriction: 
Form: 
Web resource
Publisher: 
ISSN: 
1607-9345
E_ISSN: 
Edition: